血常规是医院常作的检查项目,但是由于大部分的医院用的都是三分类的血球仪(五分类血球仪价格太高),在分析上存在一定的缺陷,而血涂片则能在一定程度上很好的补偿,使得三分类的血球仪也能起到五分类的效果。而且血涂片的作用还不仅于此,它还能更直观的放映细胞的形态,以及血液的一种状态。现在就血涂片的制作和应用做一个介绍。
血涂片的制作:
血涂片的制作方法很多,但需要的材料也都是一样的,载玻片和(或)盖玻片。现在介绍一种我们医院常用的涂片方法:
1、首先左手持一载玻片,将采到的血(做血常规剩下的血)滴一滴到载玻片一端:
血涂片
2、右手持一盖玻片作为推片,成30-45度角于血滴前方靠近血滴
血涂片
3、右手移动盖玻片使其一端与血液接触
血涂片
4、右手持盖玻片往前推动,速度不能太慢,保证血液均匀的被推开
血涂片
5、做好的血涂片
血涂片
5、血涂片做好后需要风干,之后就可以进行染色,尽管每个医院所用染色液可能不一样,但基本的方法都一致,也可以根据染色液的说明进行具体操作,我们医院用的是diff-quick染液。
染好的片子就需要在显微镜下观察,一般我们会从低倍镜开始观察,再逐次转换为高倍镜甚至油镜。
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细胞分类计数器
一般情况下,我们会在显微镜下找到一个合适的视野开始计数,按照一定的方向顺序来数白细胞,而这个视野的选着会很重要,在做血涂片的时候血涂片上通常会有三条带,中间的那一条带就是我们观察的区域,镜下会显示细胞既不重叠也不太稀疏。然后我们会把数的100个白细胞记录下来并分类,并分别记下各类细胞所占的比例。
细胞分类计数器
(细胞分类计数器)
通过这样的方法,我们就可以得到白细胞下各个种类的比例,结合血常规的白细胞数目就可以得到一个五分类的项目,这对于分析动物的身体状况更加的全面和科学。如上图的结果是:嗜中性粒细胞百分比:70%(分叶:57%,杆状:13%);淋巴性细胞百分比:25%;单核细胞百分比:3%;嗜酸性粒细胞百分比:2%;嗜碱性粒细胞百分比:0。
再简单举例说一下血涂片在临床上的应用,也是结合血常规的分析。如下图为一只犬的血常规结果:
从结果上看,RBC(红细胞)下降,HGB(血红蛋白)下降,HCT(红细胞压积)下降。很明显的可以判定为贫血。但是贫血也分很多种的,到底是否为再生性,又或者是否是出血或溶血造成的。然后根据血涂片可以知道:
从该血涂片我们可以看到,红细胞中间淡然区明显扩大,说明了这是正红细胞低色素性贫血,也就是由于缺铁性贫血,需要补充铁元素,增强营养。一方面我们知道动物的具体情况,可以针对性的帮助解决问题。
当然,血涂片在临床上的作用不仅仅如此,我们不仅可以用来来计数分类白细胞,还可以观察红细胞的形态来判断如果出现异性红细胞的原因,白细胞形态异常的原因,还可以看到血液寄生虫如:巴贝斯焦虫,血吸虫的微丝蚴。而且对于血常规仪器还可以起到一种验证的作用,就是说如果血常规的结果与你在显微镜下看到的结果出入较大的时候,如果你保证你血涂片的制作和观察都没问题的话,就要怀疑机器的判读有问题了。比喻抽血过程比较慢,导致血凝的出现而使得机器读书的血小板极低,以及由于猫的血小板和红细胞体积较近而出现的判读等都可以用血涂片来纠正和验证。